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细胞色素P450酶系总活性荧光定量检测试剂盒产品说明书
点击次数:2922 更新时间:2016-08-25
 

细胞色素P450酶是肝细胞微粒体复合功能单加氧化酶系统的总称。其分成五十多个亚酶:CYP1至CYP51。作用在于体内外源化合物(xenobiotics),包括药物、致癌剂、化学污染物的氧化代谢,即单加氧化作用(monooxygenation)和羟化作用(hydroxylation)。

 

您需要准备:

1.5毫升离心管:用于标准样品配制和反应的容器

培养箱:用于孵育反应

200微升1厘米光径比色皿或黑色96孔板:用于荧光分析的容器

 

荧光分光光度仪过荧光酶标仪:用于荧光分析

  • 准备好待测样品(例如细胞裂解萃取液或微粒体样品等),置于冰槽里
  • 设定好荧光分光光度仪(温度为37℃):激发波长370nm,散发波长450nm,并置零 
  • 准备好5个1.5毫升离心管,标记为1至5号管
  • 分别加入25微升缓冲液(Reagent A)到每个离心管
  • 移取25微升标准液(Reagent E)到1号管,混匀
  • 小心移取25微升1号管稀释的标准液(Reagent E)到2号管,混匀
  • 小心移取25微升2号管稀释的标准液(Reagent E)到3号管,混匀
  • 小心移取25微升3号管稀释的标准液(Reagent E)到4号管,混匀
  • 将1至5号管放进冰槽里备用,避免光照;标准管浓度见下表

?   计算方式:

    【根据标准曲线获得样品对应羟基香豆素浓度(微摩尔/升)×0.2(体系容量;毫升)×样品稀释倍数】÷【0.02(样品容量;毫升×15(反应时间;分钟)】=纳摩尔/毫升/分钟÷(样品蛋白浓度)毫克/毫升=纳摩尔/毫克/分钟

 

  • 本产品经鉴定性能稳定
  • 本产品经鉴定检测敏感