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主要用途:
　　动物细胞/组织线粒体粗提分离试剂是一种旨在从动物细胞或组织中分离出完整而纯化的线粒体细胞器的
而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适合于动物软组织（肝或脑组织）和培
养细胞的线粒体的制备。其制备物产量高，可以被用于细胞凋亡、信号传递、能量代谢、蛋白组学和病理
生理学等的研究。产品不含污染性蛋白酶和核酶，即到即用，性能稳定，分离产量和纯度堪称同类产品
佳。

保存方式:
　　保存净化液在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里，有效保证6 月

用户自备：
HANK 平衡盐缓冲溶液或PBS 缓冲溶液：用于清理细胞
胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液：用于细胞脱离
*细胞培养液：用于细胞处理所需的培养基
15 毫升锥形离心管：用于线粒体初步制备物的存放
50 毫升锥形离心管：用于细胞或组织收集后离心或清洗
1.5 毫升离心管：用于保存线粒体
4℃台式离心机：用于沉淀细胞
4℃超速离心机：用于分离细胞器成分
DOUNCE 匀浆器：用于裂解细胞

注意事项：

1． 本产品为10 次（1 克动物组织或5 X 107 细胞）或50 次（200 毫克动物组织或1 X 107 细胞）操作
2． 实际操作的动物组织重量或细胞量与试剂使用量按比例调整：例如200 毫克动物组织：试剂用量是标
准用量的五分之一
3． 所有操作均须严格在4℃或以下状态进行
4． 操作时，须戴手套
5． 操作时，须无菌操作，避免污染母液，尤其是裂解液（Reagent B）和保存液（Reagent E）
6． 建议使用足够的样品量
7． 建议严格控制操作时间
8． 通常匀化次数为20 至40 下（或细胞颗粒群/组织块状消失为止）达到80％的细胞裂解为理想状态，但
不同的组织或细胞类型会存在差异。用户可以通过显微镜观察3 微升匀浆物的细胞裂解程度：完整细
胞呈现发亮的圆环。低于50％可以增加匀化次数
9． 通常孵育5 分钟（不宜超过5 分钟）达到80％的细胞裂解为理想状态，但不同的组织或细胞类型会存
在差异。用户可以通过显微镜观察3 微升裂解物的细胞裂解程度：完整细胞呈现发亮的圆环。低于50
％可以增加孵育时间和涡旋震荡次数
10．对于难以裂解的细胞，例如HeLa 细胞，采用物理匀浆法是优先推荐的技术处理
11．通常1 克动物组织或5 X 107 细胞的线粒体含量为50 微克以上线粒体蛋白
12．如果需要计量线粒体，稀释后数分钟内完成，否则线粒体将分解
13．本产品所获得的线粒体纯度和产量为理想。通过调整10000g离心速度到3000至8000g，可以提高粗提
的线粒体纯化程度，但线粒体产量相应减少
14．如果需要获得99％以上纯度的线粒体，使用动物细胞/组织高质纯化线粒体分离试剂盒
15．线粒体正常活性测定方法是： CITRATE SYNTHASE 活性、氧化磷酸化、细胞色素吸收峰谱等
16．线粒体内外膜完整测定方法是：CYTOCHROME C OXIDASE 活性和荧光JC 染色
17．本公司提供线粒体套餐：ROS、NAO、MitoTRACK、JGB、线粒体溶解等
18．本公司提供系列线粒体分析试剂产品