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500毫摩尔超氧阴离子清除剂TEMPOL溶液产品说明书（中文版）

主要用途

500毫摩尔超氧阴离子清除剂TEMPOL溶液是一种旨在模拟超氧化物歧化酶的功能，清除超氧自由基阴离子的辅助试剂。其适用于氧化应急活性氧等研究。其适用于各种细胞培养、动物实验中超氧自由基阴离子的清除。产品即到即用，严格无菌，性能稳定，高纯活性。

技术背景

4-羟基-2,2,6,6,-四甲基哌啶氧（4-hydroxy-2,2,6,6-tetramethylpiperidinyloxy；TEMPO）是一种自旋标记（spin label）的水溶性稳定哌啶氮氧化合物（piperidine nitroxide），分子式是C9H18NO2，分子量为172.24。其主要作用在于自由通过质膜，具有超氧化物歧化酶的功能，清除超氧自由基阴离子，起到活性氧的解毒作用，同时具有神经保护、抗炎和镇痛作用。 

产品内容

清除剂（Reagent A）   毫升

产品说明书        1份

保存方式

保存在－20℃冰箱里，避免光照；有效保证6月

用户自备

*细胞培养液：用于支持细胞生长的营养液

细胞培养板（瓶）：用于细胞培养的容器

盖玻片：用于细胞生长的载体

台式离心机：用于悬浮细胞的收集

细胞培养箱：用于细胞孵育

15毫升锥形离心管：用于样品操作的容器

实验提示

实验开始前，将－20℃冰箱里的清除剂（Reagent A）置于冰槽里融化。然后进行下列操作：

方法一：贴壁细胞处理

• 在6孔细胞培养板里的1孔放置盖玻片
• 加入2毫升用户自备的*细胞培养液
• 加入1毫升待测细胞（1至5 X 10⁵细胞）
• 轻轻摇动，使细胞均匀分布
• 放进37℃细胞培养箱孵育，直至细胞生长到50％铺满率
• 小心抽掉细胞培养液
• 加入3毫升新鲜的用户自备的*细胞培养液
• 加入xx微升清除剂（Reagent A）
• 轻轻摇动培养板，混匀
• 放进37℃细胞培养箱孵育24小时
• 小心抽掉含有清除剂（Reagent A）的细胞培养液
• 继续后续操作

方法二：悬浮细胞处理

• 准备1个25cm²细胞培养瓶
• 加入2毫升用户自备的*细胞培养液
• 加入1毫升待测细胞（5 X 10⁵细胞）
• 轻轻摇动，使细胞均匀分布
• 放进37℃细胞培养箱孵育24小时
• 小心移出细胞培养液到15毫升锥形离心管
• 放进台式离心机离心10分钟，速度为300g
• 小心抽掉上清液
• 加入3毫升新鲜的*细胞培养液，混匀细胞颗粒群
• 加入xx微升清除剂（Reagent A）
• 轻轻摇动离心管，混匀
• 放进37℃细胞培养箱孵育24小时
• 放进台式离心机离心10分钟，速度为300g
• 小心抽掉含有清除剂（Reagent A）的细胞培养液
• 继续后续操作

方法三：动物实验

• 准备1个待测的实验动物
• 静脉注射xx微升清除剂（Reagent A）/100克动物体重 
• 或腹腔注射xx微升清除剂（Reagent A）/100克动物体重 
• 或输液/灌注xx至xx微升清除剂（Reagent A）/100克动物体重
• 注射后30分钟至4小时继续后续麻醉、断颈椎、解剖、组织制片等操作

注意事项

• 本产品为1毫升规格（100倍浓度）
• 本产品即到即用，无需进行任何处理
• 使用时，戴好手套
• 避免反复冻融
• 使用时，避免污染母液
• 细胞孵育时间可以根据用户的具体情况调整，通常为6小时至24小时
• 动物实验可以每天注射，持续1周，然后观察分析