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冰冻切片脂质苏丹黑染色试剂盒产品说明书
点击次数:939 更新时间:2022-09-06
 

冰冻切片脂质苏丹黑染色试剂盒产品说明书

 

要用途

 

 冰冻切片脂质苏丹黑染色试剂是一种旨在通过脂溶性偶氮染料苏丹 B 特异性地使组织内中性 甘油三脂、脂质以及脂蛋白显示蓝黑色,来分析固定处理的组织细胞样本中脂质状况的而经典的技术 。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种冰冻切片的人体和动物组织样本。 用于成脂细胞定性、细胞病理学分析(脂质细胞瘤; LIPOID) 等研究。产品即到即用, 操作简捷, 性能稳 定,着色清晰。

术背景

 

脂类物质(LIPIDS) 是一类脂溶性(疏水性)的自然分子,包括脂肪酸(FATTY ACID)及其衍生物甘 一脂、二脂、三脂和磷脂, 以及其它固醇类(STEROL) 物质,例如胆固醇。脂类物质在机体中具有能量 储存的作用, 是膜结构的组成成分和细胞信号分子。苏丹黑 B (SUDAN BLACK B),又称为二氢二 氮萘偶氮嵌间二氮杂苯(2 3dihydro2 2dimethyl6(4phynylazo)-1naphthyl) azo ) 1Hperimidine),是一种脂溶性偶氮染料(LYSOCHROME DIAZO DYE)。其分子式为 C26H24N4O,分子  408.51 。染色显示组织细胞脂类物质呈蓝黑色。

 

 


产品内容

 

 清理液(Reagent A)

 固着液(Reagent B)

 脱水液(Reagent C)

 染色液(Reagent D)

 澄清液(Reagent E)

品说明书

 

保存方式


 

 

1


 

保存在 4℃冰箱里;  染色液(Reagent D),避免光照;有效保证 6 月

 

用户自备

 

核固红复染试(40011):用于常规染色后复染

典水相封片液(12146):用于染色后封片处理

温箱:用于试剂预热或保存

小型染色缸:用于组织细胞染色操作

光学显微镜:用于组织细胞染色后观察分析


实验步骤

 

实验开始前,将  染色液(Reagent D) 置于 60℃温箱里预热,避免光照。然后进行下列操作。

 

 

  样本固着处理

 

1.  取出待测的 5 10 微米厚的冰冻切(注意:使用快速冰冻 snapfrozen 处理,不宜使用包埋处理)

2.  小心 xx 微升  清理液(Reagent A) 在切片上,铺满整个样品表面

3.  小心移去切片上的  清理液(Reagent A)

4.  小心加上 xx 微升  固着液(Reagent B),铺满整个样品表面

5.  室温下,孵育 10

6.  小心移去切片上的  固着液(Reagent B)

7.  小心加上 xx   清理液(Reagent A),清洗样品表面

8.  小心移去切片上的  清理液(Reagent A)

9  重复实验步骤 7 8 一次

 

二、样本染色处理

 

1  小心加上 xx 微升  脱水液(Reagent C) 在切片上,铺满整个切片样品表面

2.  室温下静置 5 分钟

3.  小心移去切片上的  脱水液(Reagent C)

4.  重复实验步骤 10 12 一次

5.  小心加上 xx 微升  染色液(Reagent D),铺满整个切片样品表面

6  室温下静置 7 分钟;或直至可见蓝黑色

7.  小心移去切片上的  染色液(Reagent D)

8.  室温下,小心将切片置入 xx 毫升  清理液(Reagent A) 中孵育 2 分钟

9.  轻轻移去切片上的  清理液(Reagent A)

 

  样本复染处理

 

1.  小加上 xx 微升  澄清液(Reagent E) 在切片上,铺满整个切片样品表面

2.  室温下孵育 3 分钟

3.  小心移去切片上的  澄清液(Reagent E)

4.  室温下,小心将切片置入 xx 毫升  清理液(Reagent A) 中孵育 2 分钟

5.  小心移去切片上的  清理液(Reagent A)

6   (选择步骤)样本复染处理(核固红)

7.  放上玻片或水相封片(注意: 建议使用  经典水相封片液-12146)

8.  即刻在一般光学显微镜下观察:脂类物质呈现蓝黑色(如果复染则细胞核呈现红色)

 

注意事

 

1   本产品为 50 次操作

2   操作时,须戴手套


3   所有操作在室温下进行

4   试剂溶液在样品表面时,避免有气泡存在,同时确保铺满样品表面

5   样品染色避免过度,肉眼可见蓝黑色即可终止染色

6  建议使用  核固红复染试剂盒(40011),增强染色对比度

7  样品染色完成后,即刻进行光学显微镜观

8  封片处理,免使用有机溶剂类包括乙醇等,而使用水相封片液;建议使用  经典水相封片 (12146)

9   本公司提供系列脂类染色试剂产品

 

质量标

 

1   本产品经鉴定性能稳定

2   本产品经鉴定显色清晰