冰冻切片弹性纤维伟郝夫范吉森染色试剂盒产品说明书 |
点击次数:1056 更新时间:2023-03-08 |
冰冻切片弹性纤维(ELASTIC)伟郝夫范吉森(Verhoeff-Van Gieson)染色试剂是一种旨在使用标准化的 化学脱蜡方法和伟郝夫(Verhoeff)苏木素以及媒染剂氯化铁,分析和区分冰冻组织切片中的弹性纤维的 而经典的技术方法。该技术经过精心改良传统方法、成功实验证明的。适用于皮肤、肾脏、动脉组织等 染色。广泛运用于动脉硬化、肺气肿、血管病变和衰老等引起的弹性纤维异常等研究。产品严格无菌,即 到即用,操作简捷,性能稳定,显色清晰。 技术背景 弹性纤维(elastic fiber),又称为黄色纤维(yellow fiber),是固有结缔组织(Connective tissue proper)细胞 外基质的成分之一,由平滑肌细胞和成纤维细胞产生弹力蛋白质(elastin)、原纤维蛋白(fibrillin;FBN) 等构成。弹性纤维具有可伸展性。存在于皮肤、肺、动脉、静脉、弹力软骨、牙周韧带(periodontal ligament)、 脂肪组织中。弹性纤维缺失导致皮肤松弛症(cutis laxa)、威廉姆斯综合征(Williams Syndrome)等疾病。 基于伟郝夫范吉森(Verhoeff-Van Gieson;VVG)的发明,应用递减性(regressive)苏木素选择性染色弹 性纤维,通过媒染剂氯化铁,帮助区别其它包括肌肉、胶原纤维、纤维蛋白(fibrin)等组织成分。伟郝夫 范吉森方法操作简便,凸显弹性纤维,难以细致区分其它组织成分。 产品内容 清理液(Reagent A) 毫升 固着液(Reagent B) 毫升 染色液(Reagent C) 毫升 媒染液(Reagent D) 毫升 稳定液(Reagent E) 毫升 复染液(Reagent F) 毫升 产品说明书 1 份 保存方式 保存在 4℃冰箱里,避免光照;试剂具有腐蚀性,注意安全;有效保证 3 月 用户自备 小型玻璃染色缸:用于组织或切片处理的容器 中性树脂:用于切片封片 光学显微镜:用于切片染色后观察分析 实验步骤 一、 样品固着处理 1. 准备好 5 微米厚的冰冻切片 2. 小心加上 xx 微升清理液(Reagent A)在切片上,铺满整个切片样品表面 3. 室温下孵育 2 分钟 4. 小心移去切片上的清理液(Reagent A) 5. 小心加上 xx 微升固着液(Reagent B)在切片上,铺满整个切片样品表面 6. 室温下孵育 5 分钟 7. 小心移去切片上的固着液(Reagent B) 8. 小心加上 xx 微升清理液(Reagent A)在切片上,铺满整个切片样品表面 9. 室温下孵育 2 分钟 10.小心移去切片上的清理液(Reagent A) 二、 样本染色处理 1. 小心加入 xx 微升染色液(Reagent C)在切片上,铺满整个切片样品表面 2. 室温下孵育 60 分钟,避免光照(注意:组织切片呈现黑色) 3. 小心移去染色液(Reagent C) 4. 室温下,小心将切片置入 xx 毫升清理液(Reagent A)中孵育 2 分钟 5. 小心移去切片上的清理液(Reagent A) 6. 小心加入 xx 微升媒染液(Reagent D)在切片上,铺满整个切片样品表面 7. 室温下孵育 2 分钟,直至肉眼或显微镜下观察背景呈现灰色,避免光照(注意:避免过度去色) 8. 小心移去媒染液(Reagent D) 9. 室温下,小心将切片置入 x 毫升清理液(Reagent A)中孵育 2 分钟 10.小心移去切片上的清理液(Reagent A) 11.小心加入 xx 微升稳定液(Reagent E)在切片上,铺满整个切片样品表面 12.室温下孵育 1 分钟 13.小心移去稳定液(Reagent E) 14.室温下,小心将切片置入 xx 毫升清理液(Reagent A)中孵育 2 分钟 15.小心移去切片上的清理液(Reagent A) 16.小心加入 xx 微升复染液(Reagent F)在切片上,铺满整个切片样品表面 17.室温下孵育 5 分钟 18.小心移去复染液(Reagent F) 19.室温下,小心将切片置入 xx 毫升清理液(Reagent A)中孵育 2 分钟 20.小心移去切片上的清理液(Reagent A) 21.(选择步骤)透明澄清处理 22.放上盖玻片或封片(中性树脂) 23.即刻在一般光学显微镜下观察: 2 注意事项 1. 本产品为 50 次操作 2. 操作时,须戴手套 3. 试剂具有腐蚀性,注意操作安全 4. 建议使用玻璃染色缸 5. 每次更换试剂溶液时,保持切片面基本晾干 6. 试剂溶液在切片表面时,避免有气泡存在,同时确保铺满切片表面 7. 整个操作,在避光状态下进行 8. 染色完成后,即刻进行光学显微镜观察 9. 样品染色后保存,避免光照 10.本公司提供系列特定组织染色试剂产品 质量标准 1. 本产品经鉴定性能稳定 2. 本产品经鉴定显色清晰 |
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