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冰冻切片弹性纤维伟郝夫范吉森染色试剂盒产品说明书
点击次数:1056 更新时间:2023-03-08
 

冰冻切片弹性纤维(ELASTIC)伟郝夫范吉森(Verhoeff-Van Gieson)染色试剂是一种旨在使用标准化的

化学脱蜡方法和伟郝夫(Verhoeff)苏木素以及媒染剂氯化铁,分析和区分冰冻组织切片中的弹性纤维的

而经典的技术方法。该技术经过精心改良传统方法、成功实验证明的。适用于皮肤、肾脏、动脉组织等

染色。广泛运用于动脉硬化、肺气肿、血管病变和衰老等引起的弹性纤维异常等研究。产品严格无菌,即

到即用,操作简捷,性能稳定,显色清晰。 技术背景

弹性纤维(elastic fiber),又称为黄色纤维(yellow fiber),是固有结缔组织(Connective tissue proper)细胞

外基质的成分之一,由平滑肌细胞和成纤维细胞产生弹力蛋白质(elastin)、原纤维蛋白(fibrillin;FBN)

等构成。弹性纤维具有可伸展性。存在于皮肤、肺、动脉、静脉、弹力软骨、牙周韧带(periodontal ligament)、

脂肪组织中。弹性纤维缺失导致皮肤松弛症(cutis laxa)、威廉姆斯综合征(Williams Syndrome)等疾病。

基于伟郝夫范吉森(Verhoeff-Van Gieson;VVG)的发明,应用递减性(regressive)苏木素选择性染色弹

性纤维,通过媒染剂氯化铁,帮助区别其它包括肌肉、胶原纤维、纤维蛋白(fibrin)等组织成分。伟郝夫

范吉森方法操作简便,凸显弹性纤维,难以细致区分其它组织成分。 产品内容

清理液(Reagent A) 毫升

固着液(Reagent B) 毫升

染色液(Reagent C) 毫升

媒染液(Reagent D) 毫升

稳定液(Reagent E) 毫升

复染液(Reagent F) 毫升

产品说明书 1 份

保存方式

保存在 4℃冰箱里,避免光照;试剂具有腐蚀性,注意安全;有效保证 3 月

用户自备

小型玻璃染色缸:用于组织或切片处理的容器

中性树脂:用于切片封片

光学显微镜:用于切片染色后观察分析

实验步骤

一、 样品固着处理

1. 准备好 5 微米厚的冰冻切片

2. 小心加上 xx 微升清理液(Reagent A)在切片上,铺满整个切片样品表面

3. 室温下孵育 2 分钟

4. 小心移去切片上的清理液(Reagent A)

5. 小心加上 xx 微升固着液(Reagent B)在切片上,铺满整个切片样品表面

6. 室温下孵育 5 分钟

7. 小心移去切片上的固着液(Reagent B)

8. 小心加上 xx 微升清理液(Reagent A)在切片上,铺满整个切片样品表面

9. 室温下孵育 2 分钟

10.小心移去切片上的清理液(Reagent A)

二、 样本染色处理

1. 小心加入 xx 微升染色液(Reagent C)在切片上,铺满整个切片样品表面

2. 室温下孵育 60 分钟,避免光照(注意:组织切片呈现黑色)

3. 小心移去染色液(Reagent C)

4. 室温下,小心将切片置入 xx 毫升清理液(Reagent A)中孵育 2 分钟

5. 小心移去切片上的清理液(Reagent A)

6. 小心加入 xx 微升媒染液(Reagent D)在切片上,铺满整个切片样品表面

7. 室温下孵育 2 分钟,直至肉眼或显微镜下观察背景呈现灰色,避免光照(注意:避免过度去色)

8. 小心移去媒染液(Reagent D)

9. 室温下,小心将切片置入 x 毫升清理液(Reagent A)中孵育 2 分钟

10.小心移去切片上的清理液(Reagent A)

11.小心加入 xx 微升稳定液(Reagent E)在切片上,铺满整个切片样品表面

12.室温下孵育 1 分钟

13.小心移去稳定液(Reagent E)

14.室温下,小心将切片置入 xx 毫升清理液(Reagent A)中孵育 2 分钟

15.小心移去切片上的清理液(Reagent A)

16.小心加入 xx 微升复染液(Reagent F)在切片上,铺满整个切片样品表面

17.室温下孵育 5 分钟

18.小心移去复染液(Reagent F)

19.室温下,小心将切片置入 xx 毫升清理液(Reagent A)中孵育 2 分钟

20.小心移去切片上的清理液(Reagent A)

21.(选择步骤)透明澄清处理

22.放上盖玻片或封片(中性树脂)

23.即刻在一般光学显微镜下观察:

2

注意事项

1. 本产品为 50 次操作

2. 操作时,须戴手套

3. 试剂具有腐蚀性,注意操作安全

4. 建议使用玻璃染色缸

5. 每次更换试剂溶液时,保持切片面基本晾干

6. 试剂溶液在切片表面时,避免有气泡存在,同时确保铺满切片表面

7. 整个操作,在避光状态下进行

8. 染色完成后,即刻进行光学显微镜观察

9. 样品染色后保存,避免光照

10.本公司提供系列特定组织染色试剂产品

质量标准

1. 本产品经鉴定性能稳定

2. 本产品经鉴定显色清晰