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 纯化线粒体冻存液产品说明书

主要用途

 纯化线粒体冻存液是一种旨在帮助冷冻环境下储存各种分离的纯化线粒体（人体和动物等），确  保其膜完整性、维持新鲜状态的超微结构和生物学功能的保护性介质。该溶液由大师级科学家精心研制、  成功实验证明的。产品严格无菌， 即到即用， 性能稳定， 无病毒和支原体， 维护线粒体活力高达 95％以上。

技术背景

冻存保护（Cryopreservation）是长期储藏和保存生物活体材料的基本手段。但是，在冻存过程中活体将受 到物理或化学性伤害诸如冰结晶体的形成、渗透压的变化以及化学物毒性等，尤其是致命性的活体内冰产 生， 所导致牵延和缩水等物理性损伤。作为冻存保护剂之一的丙三醇（Glycerol）被证实能够阻止冰晶体的 发生。根据线粒体的生物学需求， 冻存溶液含有海藻糖（Trehalose），一种天然性二糖， 在植物中帮助共生 的物质， 且防止脱水。在线粒体保存中， 维护膜完整性、维持新鲜状态下的超微结构和生物学功能达到 95 %以上，包括 ATP 合成，膜电位，钙诱导性肿胀等。

产品内容

 冻存液（Reagent A）

产品说明书

保存方式

保存  冻存液（Reagent A）在－20℃的冰箱里，有效保证 6 月

用户自备

1.5 毫升离心管：用于线粒体收集后离心

4℃微型台式离心机：用于沉淀线粒体

2 毫升冻存管：用于线粒体冷冻储藏

实验步骤

实验开始前， 将试剂盒里的  冻存液（Reagent A）从－20℃的冰箱里取出， 置于室温下溶化。然 后进行下列操作。

1 ． 将分离纯化的 500 微升线粒体悬液（50 毫克/毫升）移入到 1.5 毫升离心管

2 ． 放进 4℃微型台式离心机离心 5 分钟，速度为 16000g（或 13000RPM，例如 EPPENDORF 5415） 3 ． 小心抽去上清液

4 ． 加入 xx 微升  冻存液（Reagent A）

5 ． 轻轻混匀颗粒群

6 ． 分批 50 微升移入到干冰预冷的冻存管里

7 ． 即刻放进液氮罐里快速冷冻

8 ． 24 小时后，放进－70℃的冰箱里保存

注意事项

1． 本产品为 50 毫升规格

2． 所有冻存操作和使用工具均须在严格无菌状态下进行

3． 操作时，避免污染母液

4． 如果线粒体悬液容量低于 xx 微升，可以直接加入  冻存液（Reagent A） 

5． 冻存管线粒体冻存量可以达到每毫升 50 毫克

6． 冻存和解冻的基本原则是冷冻速度快速（放进液氮后快速冷冻， 再放进－70℃冰箱里保存），解冻速度 快速（用手捂热解冻）

7． 本产品可以部分保护部分线粒体生物能量学功能

8． 本公司提供系列细胞冻存产品

质量标准

1 ． 本产品经鉴定性能稳定

2 ． 本产品经鉴定无病毒和支原体污染

3 ． 本产品经鉴定维护线粒体活力高达 95％以上