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大鼠白介素ELISA试剂盒操作注意事项
点击次数：514 更新时间：2024-11-06
 

大鼠白介素ELISA试剂盒操作注意事项

个人防护

  • 手套和防护：试剂盒中的终止液是酸性的，操作时请记得戴手套，避免接触皮肤和眼睛。如果不小心接触到，立即用大量清水冲洗。

试剂保存

  • 温度控制：试剂盒要放在2~8℃的冰箱里保存，并在有效期内使用。

  • 标准品保存：用不完的标准品，要么丢掉，要么分装后放在-20～-80℃的冰箱里。

试剂回温

  • 室温恢复：使用前，让试剂在室温下恢复30分钟，并确保所有成分和样品都充分混匀。

避免污染

  • 一次性用品：实验中使用一次性EP管、枪头、封板膜和干净的塑料容器，以避免交叉污染。

操作一致性

  • 标准操作：实验中，对标准品和样本进行复孔检测，并保持试剂加入顺序一致。每次检测都需要做标准曲线。

洗涤清楚

  • 全部清洗：洗板时去除残留液体，以获得最佳结果。洗完后立即进行下一步，不要让微孔板干掉。

避免气泡

  • 轻柔混匀：在重溶或混匀标准品时，要轻柔操作，避免产生气泡。

显色和终止

  • 显色底物：显色底物添加前应无色，并避光保存。

  • 终止液顺序：终止液的添加顺序应与显色底物相同。添加后，底物颜色应从蓝变黄。

样本处理

  • 去除沉淀：去除样本中可见的沉淀，避免使用溶血或高血脂样本，以免影响结果。

样本稀释

  • 稀释检测：如果样本中靶标物浓度过高，需要适当稀释后再检测。正式实验前，先做预实验确定稀释倍数。

遵循这些注意事项，可以确保ELISA实验的准确性和可靠性。

样本稀释小贴士

为什么要稀释样本？

  • 如果样本中目标物质的浓度太高，超过了测试范围，就需要稀释，以便准确测量。

稀释到什么程度？

  • 稀释后，样本信号应在标准曲线中间范围内，以确保数据准确。

稀释的小技巧

  • 大倍数稀释时，建议分步进行，比如先稀释10倍，再从这个基础上稀释20倍，得到准确的200倍稀释液。

取多少样本？

  • 取样时，至少5微升，以减少操作误差。

预实验很重要

  • 正式实验前，先做小实验，确定样本需要稀释的倍数。

稀释操作要规范

  • 特别是大倍数稀释时，要规范操作，减少误差。

稀释后的样本怎么保存？

  • 稀释后的样本要妥善保存，避免反复冻融，防止蛋白质降解。建议分装后放在-20℃或-70℃的冰箱里。

样本预处理

  • 不同类型的样本需要不同的预处理方法，合适的预处理是确保实验准确的关键。

稀释液的选择

  • 稀释样本时，最好用和标准品一样的稀释液，以保持实验条件一致。

希望这些小贴士能帮助你顺利完成ELISA实验，获得准确结果。