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问：普通干型透析袋使用前必须预处理吗？具体步骤是什么？

答：必须预处理，多数普通干型透析袋带甘油涂层，不处理会污染样品。标准步骤为：第一步剪取 10 - 20cm 合适长度的透析袋；第二步在大量 2% 碳酸氢钠与 1mmol/L EDTA（pH8.0）溶液中煮沸 10 分钟；第三步用蒸馏水清洗；第四步再放入 1mmol/L EDTA（pH8.0）溶液煮沸 10 分钟；最后冷却后浸于溶液中 4℃保存，使用前再用蒸馏水冲洗干净。实验要求不高时，也可直接沸水煮 10 分钟简化处理。

问：装样时透析袋该预留多少空间，为什么？

答：需预留 1/3 - 1/2 的空间。因为透析过程中，袋外的水和缓冲液会因渗透压进入袋内，尤其含盐量高的蛋白质溶液透析过夜时，体积增加 50% 属于正常情况，预留空间能避免透析袋被涨破。

问：如何选择干型透析袋的截留分子量？

答：要以需保留的大分子和待去除的小分子分子量为依据。需分离的两种物质分子量比率至少为 25，且经验法则是选择截留分子量约为待保留大分子分子量的一半，这样能保证至少 90% 的大分子保留率，比如要保留分子量 14000 的蛋白，可选 7000D 的透析袋。

问：透析时透析液和样品的体积比例多少合适？透析过程中需要更换透析液吗？

答：透析液体积建议为样品体积的 100 倍，例如 10 毫升样品需用 1L 透析液。透析过程必须更换透析液，通常过夜透析至少更换 3 次，可在透析后 2 - 4 小时、6 - 8 小时和 10 - 14 小时更换，最后一次更换后还需继续透析至少 2 小时；若样品中污染物浓度高，需更频繁更换透析液。

问：干型透析袋使用时对温度有什么要求？

答：温度取决于透析袋膜类型和样品特性。再生纤维素材质的干型透析袋可承受温度最高达 60℃，纤维素材质的则可达 37℃。设定温度时既要满足透析效率，也要避免高温破坏样品活性，比如透析蛋白样品时，温度不宜过高以防蛋白变性。

问：操作干型透析袋时为何要戴手套？

答：一方面，预处理后的透析袋已处于洁净状态，手套可避免手上的汗液、油脂、微生物等污染透析袋和袋内样品；另一方面，部分实验样品或透析液可能具有腐蚀性或毒性，手套也能起到保护操作人员的作用。

问：干型透析袋受潮后该如何保存？能否再次晾干保存？

答：受潮后不能晾干保存，否则会造成膜的孔隙结构不可恢复的倒塌。应将其浸泡在 0.05%-0.1% 叠氮钠、1% 苯甲酸钠、1% 甲醛或 1mmol/L EDTA 溶液中，置于 4℃环境保存。

问：哪些化学物质会损坏干型透析袋，需特别避开？

答：多种化学物质会不可逆破坏透析袋微孔，需避开。比如烃、卤化烃、酮、酯、胺等有机溶剂；甲酸、乙酸及 5% 盐酸等酸类；10% 苯酚、30% 双氧水等。另外，甲醇、乙醇浓度小于 5% 时虽透析功能存在，但会改变截留分子量，也需谨慎使用。

问：如何检查干型透析袋是否有破损？

答：装样前可做简易检漏。将透析袋一端用夹子夹紧，灌满蒸馏水，再夹紧另一端，之后用手指适当加压，观察袋体是否有漏水情况；也可装入清水后浸泡在干净容器中，静置片刻，若容器内出现水珠或水位上升，说明透析袋有破损。

问：未开封和已开封的干型透析袋分别该如何长期储存？

答：未开封的干型透析袋可在室温或 4℃条件下，放在聚乙烯袋中储存；已开封未使用的需密封好以防干裂，同样可室温或 4℃保存。其保质期通常为两年，储存时需避免接触腐蚀性物质和强光直射。