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无血清非程序冻存液(即用型)操作说明
点击次数:226 更新时间:2026-01-23
 

产品基础信息

产品编号
产品名称
规格1
规格2
规格3
储存条件
运输条件
YYX180438
无血清非程序冻存液
10 mL×5
50 mL
100 mL
2-8°C,保质期12个月
冰袋运输
(附:产品说明书 1份)

一、产品简介

在细胞体外培养工作中,为实现细胞生物活性的长期保存,需对细胞进行冷冻处理,待实验需求时复苏培养。目前液氮冷冻保存法应用广泛,核心是通过添加适宜保护剂使细胞缓慢降温,从而达到保护效果。
语燕生物研发的该款无血清非程序冻存液,特别添加细胞沉降稳定剂,可延缓冻存过程中细胞沉降速率,避免细胞挤压影响冻存质量;同时复配细胞膜保护剂、渗透性与非渗透性细胞保护剂,通过水合作用弱化水结晶过程、增加溶液粘性,显著减少冰晶对细胞的损伤,大幅提升细胞复苏存活率。
产品配方成分明确,不含血清及动物源性蛋白,有效降低细菌、病毒、支原体等污染风险,保障冻存细胞安全。适用范围广泛,涵盖常规细胞系、原代细胞,亦适配无血清培养细胞与蛋白表达细胞。
相较于传统冻存液,本品无需繁琐程序冻存步骤及昂贵程序降温仪,细胞重悬后可直接置于-80°C超低温冰箱长期保存(需保证温度稳定);若需更长期稳定保存,可将冻存管于-80°C超低温冰箱过夜(>16 h)冻存后,转移至液氮罐存放。

二、产品特点

  1. 即用型设计,随取随用,2-8°C条件下可稳定保存1年以上,无需提前制备;

  2. 省去程序冻存流程与程序降温仪投入,直接放入-80°C超低温冰箱即可,节省实验时间与人力成本;

  3. 细胞复苏率可达90%以上,适配多数哺乳动物细胞冻存需求;

  4. 无血清配方,批次间差异小,实验结果重复性更优;

  5. 可有效维持干细胞多向分化潜能,满足特殊细胞培养研究需求;

  6. 化学成分明确,无外源蛋白添加,既减少污染机会,又避免外源蛋白对细胞正常生长分化的干扰。

三、使用说明

(一)细胞冻存

  1. 选取对数生长期细胞(汇合度约90%),冻存前24 h内完成换液,收集细胞并制备成单细胞悬液(贴壁细胞需用胰酶消化),计数确保细胞活率>90%;

  2. 将细胞悬液以1000 r/min离心5 min,弃去上清液;

  3. 向细胞沉淀物中加入本品,轻轻吹打混匀,调整细胞密度至2-5×10⁶个/mL;

  4. 按0.5 mL或1.0 mL/管的量,将细胞悬液分装至无菌冻存管,拧紧管盖并做好清晰标记;

  5. 直接将分装完毕的冻存管移入-80°C超低温冰箱,确保冰箱温度稳定;

  6. 如需长期稳定保存,可经-80°C超低温冰箱过夜(>16 h)冻存后,转移至液氮罐中长期存放。

(二)细胞复苏

  1. 将水浴锅预热至37°C,佩戴一次性PE无菌手套,在无菌离心管中加入9 mL预热好的无菌培养基;

  2. 从液氮罐中取出冻存管,迅速放入PE手套中并浸入37°C水浴锅,轻轻摇晃加速溶解,力争1分钟内融解。        小贴士:若液氮罐与水浴锅距离较远(步行超过1 min),需先将冻存管置于干冰上转运,避免温度回升产生冰晶损伤细胞;冻存管装入PE手套可预防污染,融解过程需快速高效,建议同步使用计时器;若1分钟内未融解,可能因冻存液量过多或摇晃力度不足,需及时调整。

  3. 在超净工作台内,将复苏后的细胞液移入装有新鲜培养基的离心管,以1200 rpm离心3 min,弃去上清;

  4. 用对应细胞的培养基重悬细胞,接种至无菌培养瓶/培养皿,补充适宜量培养基后,放入培养箱培养。

四、产品稳定性及保存条件

  1. 本品需在2-8°C避光环境下保存,有效期1年;为保障冻存效果,严禁冻融本品,避免影响成分活性;

  2. 请在保质期内使用,过期产品请勿使用,以防降低细胞复苏存活率。

五、注意事项

  1. 本品经3次0.22 μm过滤除菌处理,使用全程需严格无菌操作,杜绝污染;

  2. 操作时请穿戴实验服及一次性手套,保障自身安全与健康;

  3. 冻存管分装完成后,减少室温/4°C环境存放时间,尽快移入-80°C超低温冰箱,且需确保冰箱温度稳定;

  4. 冻存管盖务必拧紧,防止液氮渗入,避免复苏时发生冻存管炸裂;

  5. 针对敏感细胞系、珍贵细胞系、原代细胞样本冻存,建议使用前行1周以上的冻存测试,确认无异常后再正式冻存;

  6. 本品为语燕生物科研专用产品,仅用于科研实验,不可用于诊断、治疗、临床及其他非科研用途。

16 h)冻存后,转移至液氮罐存放。