产品概述 本产品采用独特裂解系统,无需苯酚/氯仿,专为多糖多酚植物(如果实、种子)及真菌设计。提取的RNA纯度高、杂质少,可直接用于RT-PCR、qPCR、Northern blot等下游实验。 核心特点 针对性强:专攻多糖多酚等难提样本。 安全快捷:无毒害试剂,1小时内完成提取。 稳定可靠:RNA质量高,极少含DNA及蛋白污染。
规格与保存 主要组份 Buffer RPA (30 ml)、RNase-free DNase (500 μl)、Buffer DB (3.5 ml) Buffer RW1 (40 ml)、Buffer RW2 (12 ml)、Buffer TB (10 ml) 过滤柱(RF)与吸附柱(RC)各50套、1.5ml离心管50个 自备材料:β-巯基乙醇、无水乙醇
简要操作步骤 裂解:液氮研磨样品(50-100 mg),加入含β-巯基乙醇的Buffer RPA,涡旋混匀,12,000 rpm离心2 min。 过滤:上清液转入过滤柱(RF),12,000 rpm离心2 min,收集滤液。 结合:滤液加0.4倍体积无水乙醇,混匀后转入吸附柱(RC),12,000 rpm离心15s,弃废液。 去杂质:加350 μl Buffer RW1,12,000 rpm离心1 min,弃废液。 DNase消化:柱中央加入80 μl DNase工作液(10 μl DNase + 70 μl Buffer DB),室温静置15 min。 洗涤:加350 μl Buffer RW1离心弃废液;再加500 μl Buffer RW2(已加乙醇)室温静置2 min后离心弃废液,重复一次。 空甩:12,000 rpm空甩3 min,去除残留乙醇。 洗脱:换新管,加50-100 μl Buffer TB,室温静置1-2 min,12,000 rpm离心1 min收集RNA。产物于-80℃保存。
注意事项 仅供科研使用。操作时请穿戴实验服、手套和口罩。 Buffer RPA若有沉淀,需60℃加热溶解至室温后使用。 配制的裂解液(Buffer RPA + β-巯基乙醇)可4℃保存1个月。 使用需在Buffer RW2中加入48 ml无水乙醇。 步骤11的空甩至关重要,残留乙醇会影响后续实验。
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