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植物黑色素含量比色法定量检测试剂说明书
点击次数：32 更新时间：2026-08-17
 

一、主要用途

本试剂基于碱性水解原理，可释放样品中可溶性黑色素分子，通过分光光度仪比色分析，实现植物样品黑色素含量的定量检测。适用于种子、叶片、根、胚胎叶、上胚轴等各类植物组织裂解悬液的黑色素检测。产品无菌、操作简便、性能稳定、检测结果准确。

二、技术背景

黑色素是酪氨酸衍生物复合物，广泛存在于原核生物、动植物体内，属于棕黑色沉积色素，不含铁、含硫，不溶于水及常规有机溶剂，可经强碱长期溶解、强氧化剂脱色。黑色素主要分为优黑素与褐黑素两类，优黑素为二羟基吲哚、二羟吲哚羧酸及其还原产物的多聚体，呈棕黑色；褐黑素为苯并噻嗪类分子，呈棕红色。
动植物体内黑色素多与蛋白质结合形成复合物，由黑色素细胞合成并储存于胞质颗粒中，经多巴氧化酶作用可转化为多巴黑色素。真菌、酵母中黑色素主要成分为1,8-二羟基萘黑色素和多巴黑色素，分别通过聚酮通路、多酚氧化酶途径合成，多结合于细胞壁，具备抗氧化、抵御紫外线损伤、结合铁离子、拮抗病原菌、抵御水解酶及抗菌剂等作用。
植物黑色素多为儿茶酚黑色素，普遍存在于植物种子中，种子色泽与黑色素含量直接相关，可通过转化光能为植物代谢提供化学能。含有黑色素的样品经碱性水解后可释放可溶性黑色素，在360nm波长下通过分光光度仪检测吸光度变化，即可计算样品总黑色素含量。

三、产品内容

清理液（Reagent A）：若干毫升
裂解液（Reagent B）：若干毫升
处理液（Reagent C）：若干毫升
溶解液（Reagent D）：若干毫升
缓冲液（Reagent E）：若干毫升
标准液（Reagent F）：若干毫升
产品说明书：1份

四、保存方式

标准液（Reagent F）于-20℃避光保存，其余试剂4℃保存；溶解液（Reagent D）、缓冲液（Reagent E）、标准液（Reagent F）具有腐蚀性，操作时需做好防护。产品有效期6个月。

五、用户自备器材与设备

1.5mL离心管、15mL锥形离心管、DOUNCE匀浆器、恒温培养箱/恒温水槽、微型台式离心机、1mL比色皿、分光光度仪。

六、实验步骤

（一）样品准备

1. 称取200mg新鲜植物组织（叶片、谷粒、种子等）；
2. 可选：将样品置于预冷15mL锥形离心管中，加入适量清理液清洗1次；
3. 用刀片切碎组织，放入预冷15mL锥形离心管；
4. 加入适量预冷裂解液，涡旋震荡5s混匀；
5. 冰浴条件下用匀浆器匀化组织（约80次）；
6. 将匀浆转移至1.5mL离心管，4℃、5000g离心10min；
7. 吸取500μL上清液至新离心管，取10μL上清液用于蛋白质定量检测；
8. 剩余样品16000g离心5min，弃上清；
9. 向沉淀中加入适量处理液，16000g、4℃离心5min，弃上清；