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ELISA试剂盒原理—鸡血液中IgG含量测量实验步骤
点击次数:1236 更新时间:2013-08-09
 
ELISA试剂盒原理—鸡血液中IgG含量测量实验步骤
步骤:
 
1包被:用包被缓冲液稀释待测鸡血(能够稀释成不同的浓度,如1:100,1:1000,1:10000),包被液稀释鸡IgG(要做背比稀释),100ul/孔,4度过液。

 2封闭:3%BSA的PBST,100ul/孔,4度过ye或37度1h。

3一抗:用含1%BSA的PBST稀释兔抗IgG(比例依照抗体的说明书)100ul/孔,37度1h

若是这个抗体应该是HRP符号的。可以直接加底物反应,若不是还需要再加一步孵育HRP符号的抗兔抗体。

4底物显色:加TMB显色液(这个公司都有卖的)100ul/孔。避光10-15分钟。

5停止:2M硫酸终止。

6酶标仪检测。

后根据规范品作规范曲线,样品的OD带入规范曲线计算浓度。
 
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