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ELISA试剂盒加底物显色以及间接法
点击次数：1494 更新时间：2013-08-21
 

        ELISA试剂盒间接法之所以能成功关键点是纯度和抗原。虽然有些时候使用粗提抗原包被也能够获取实际有效的检测结果，但是应该尽量给予纯化，这样一来就可以提高ELISA试验的特异性。

 

        特别要注意的是除了能与普通健康人血清产生反应的杂质，比如以肠埃希氏菌作为工程酶的重组抗原，又比如其中含有肠埃希氏菌的成份，极有可能和受过肠埃希氏菌感染者血清中的抗肠埃希氏菌抗体之间产生反应。

 

        与酶标抗人Ig反应的物质也可以在抗原中，如果抗原来源于人血浆或者是人体组织，假设您不将其中的Ig抹去，试验的过程中也会发生假阳性的一系列反应。还有就是如果有包含无关蛋白的抗原，也会因为竟争吸附导致包被效果的不准确。

 

        普通血清中所含的高浓度的非特异性抗体是简介法中的另一种干扰因素。在病人血清中受检的特异性血清中免疫球蛋白主成分只占总IgG中的小部分。

 

        血清中免疫球蛋白主成分的吸附性很强，非特异血清中免疫球蛋白主成分可直接吸附到固相载体上，也可吸附到包被抗原的表面。所以在间接法中抗原包被后一般用无关蛋白质（例如BSA）再包被一次，以封闭堵塞固相上的空余缝隙。还有在检测的过程中标本必须先金星稀释，用于避免过高的阴性本底导致判断结果的偏差！

 

        ELISA试剂盒加底物显色这种方法主要是对病原体抗体的检测而进行传染病的诊断。间接法的优势是只需要变动包被 抗原就可以用同一酶标抗抗体检测相应抗体的方法。