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DMEM培养基配置的方法以及注意事项
点击次数：5024 更新时间：2013-09-18
 

　　配制DMEM培养基过滤前和过滤后的NaHCO3，双抗体可以添加，也可以不加，能加入浆液过滤，在好的或，见细胞和血清浓度，不同，不同的细胞需要的同时，冻存细胞需要培养基血清含量较高，一般为20%-30%。此外，包装后的培养基和血清过滤，除了被用于一瓶，其他存储在-20度，或一部分，如谷氨酰胺易降解。

　　

　　配制DMEM培养基可以先用后的体积是2/3的水溶解配制，包装袋也需要清洗。2G*溶解的碳酸氢钠此外，加双抗后，定容至终体积。过滤到零下20摄氏度保存。添加血清的时候。

　　

　　根据我的经验，配制DMEM培养基正常血清没有过滤，双抗体不需要过滤，可添加在前面（如果需要的话，除非双反）培养基的罕见的内容，否则就不需要在零下20摄氏度保存，培养两周跑出去不在4存储任何问题。另外，我不同意与冷冻细胞明显高于血清，没有根据。在ATCC细胞冻存的描述看，我很少使用血清，一般10%二甲基亚砜+90%和冷冻液配方血清中是常用的。冻存存活率*的细胞。（当然，冷冻也是非常重要的存储过程）

　　

　　配制DMEM培养基时血清不必要过滤，但我认为双反应进行过滤，毕竟，是不是很麻烦。同时对细胞冷冻血清添加量存在着一定的问题，重要的是冷冻程序，如离心速度不太大，有二甲基亚砜的量不能超过10%，这是非常重要的。

　　

　　配制DMEM培养基除了DMEM粉末直接加入，也应按照说明书添加碳酸氢钠适量，它是关于2G，pH值可能远大于你所需要的pH值，再加入适量HEPES，约2.38g，pH满意度，根据需要添加双抗，过滤，分装。如果数量不多，储存超过20度，必要时添加血清，血清是不需要消毒，因为合格血清已达到无菌的条件下，摇它