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HL10118.1细胞/组织溶酶体粗提分离试剂盒产品说明书
点击次数:1258 更新时间:2016-06-14
 

主要用途

        我公司细胞/组织溶酶体粗提分离试剂是一种旨在从动物细胞或组织中分离出完整而纯化的溶酶体细胞器的而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适合于动物软组织(肝或脑组织)和培养细胞的溶酶体的制备。

注意事项

  • 本产品为10次(1克动物组织或 108细胞)操作
  • 所有操作均须严格在4或以下状态进行
  • 操作时,须戴手套
  • 操作时,须无菌操作,避免污染母液,尤其是裂解液(Reagent B)分离液(Reagent E
  • 建议使用足够的样品量
  • 建议严格控制操作时间
  • 通常匀化次数为20至40下(或细胞颗粒群/组织块状消失为止)达到80%的细胞裂解为理想状态,但不同的组织或细胞类型会存在差异。用户可以通过显微镜观察3微升匀浆物的细胞裂解程度:完整细胞呈现发亮的圆环。低于50%可以增加匀化次数
  • 通常孵育5分钟(不宜超过5分钟)达到80%的细胞裂解为理想状态,但不同的组织或细胞类型会存在差异。用户可以通过显微镜观察3微升裂解物的细胞裂解程度:完整细胞呈现发亮的圆环。低于50%可以增加孵育时间和涡旋震荡次数
  • 对于难以裂解的细胞,例如HeLa细胞,采用物理匀浆法是优先推荐的技术处理
  • 通常1克动物组织或 108细胞的溶酶体含量为300微克左右溶酶体蛋白

11. 如果需要获得99%以上纯度的溶酶体,使用细胞/组织高质纯化溶酶体分离试剂盒-10118.3 

  • 溶酶体标志酶活性测定,建议使用通用型N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶NAG)活性比色法定量检测试剂盒0031.1和纯化溶酶体酸性磷酸酶活性比色法定量检测试剂盒50318.3 
  • 溶酶体形态和功能染色,建议使用细胞溶酶体形态染色试剂盒10121和纯化溶酶体功能中性红检测试剂盒10323 
  • 本公司提供系列溶酶体分析试剂产品
  • 如:
  • 细胞/组织活性溶酶体分离试剂盒
  • 细胞/组织高质纯化溶酶体分离试剂盒