技术文章Article 首 页 > 技术文章 > 细胞γ分泌酶活性荧光共振能量转移法(FRET)定量检测试剂盒
细胞γ分泌酶活性荧光共振能量转移法(FRET)定量检测试剂盒
点击次数:2037 更新时间:2016-06-24
 

主要用途

   我公司细胞γ分泌酶γ-SECRETASE)活性荧光共振能量转移法(FRET)定量检测试剂是一种旨在通过荧光探针NMA供体DNP受体双重标记的多肽底物,在γ分泌酶水解作用下,释放出强烈荧光的NMA,而发生荧光峰值的变化,即采用荧光共振能量转移法来测定样品中活性的而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞裂解萃取液样品(动物、人体)、部分或*纯化酶样品中γ分泌酶活性的定量检测,以及抑制剂激活剂的筛选。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,安全可靠。

注意事项

  • 本产品为25次操作,包括标准液
  • 建议使用膜蛋白样品为佳(推荐使用细胞可溶性膜蛋白(粗提)制备试剂盒
  • 操作时,须戴手套
  • 系统操作过程中,标准液测定只需1次
  • 样品须澄清,至关重要
  • 孵育反应完成后即刻进行荧光测定
  • 荧光滤波器可以使用激发波长在340-360nm,散发波长440-450nm
  • 待测样本为粗提酶样品,其蛋白浓度为20微克/20微升;膜蛋白样品,为50微克/20微升细胞裂解悬液,为100微克/20微升(本公司提供  Bradford蛋白质浓度定量试剂盒)
  • 如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度
  • 相对荧光读数RFU(Relative Fluorescence Unit)越高,表明酶活性越
  • 用户可以使用γ分泌酶抑制剂L685,458(IC50=17纳摩尔)作为抑制剂对照或阴性对照
  • γ分泌酶活性单位浓度定义:在37℃温度下,pH 6.8条件下,每分钟内能够水解释放1摩尔荧光产物NMA所需的酶量作为一个活性单位
  •  
  • 本公司提供系列蛋白酶检测试剂产品
  • 如:
  • 组织γ分泌酶(γ-SECRETASE)活性荧光淬灭法定量检测试剂盒