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动物细胞衰老特异性β-半乳糖苷酶活性高质敏感比色法定量检测
点击次数：1217 更新时间：2016-06-30
 

主要用途

        我公司动物细胞衰老特异性β-半乳糖苷酶活性高质敏感比色法定量检测试剂是一种旨在使用化学方法，快速有效地裂解动物细胞，通过高速离心，获得澄清细胞裂解悬液，在β-半乳糖苷酶反应体系里，以氯苯胺红 -β-D- 吡喃半乳糖苷为棕黄色底物，水解所产生的暗红色的氯苯胺红，即采用比色法定量测定细胞裂解悬液制备样品中的低表达β-半乳糖苷酶活性，藉此评价作为细胞复制性衰老（replicative senescence）的分子特征来探测衰老状况的而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。广泛应用于细胞生物学研究。其适用于各种人体和动物细胞裂解悬液等样品衰老细胞内源性半乳糖苷酶活性分析。产品即到即用，性能稳定，参数优化，操作简便、高度敏感。

注意事项

  • 本产品为20次（比色皿）和80次（96孔板）操作
  • 本产品的各项参数达到优化
  • 建议操作时，注意避光
  • 操作时，须戴手套
  • 反应液（Reagent D）严格避免光照和反复冻融
  • 用户可以根据需求按比例调整试剂用量进行样品制备
  • 用户可以测定细胞裂解悬液的蛋白浓度，便于计算活性单位之需；建议使用 Bradford蛋白质浓度定量检测试剂盒（30030.1）
  • 如果用户需要测定背景空对照，可以*按照活性检测的操作步骤进行，*变化在于100微升样品改成100微升裂解液（Reagent B）替代
  • 如果用户测得背景空对照，计算活性时，勿忘（样品吸光读数－背景空对照读数）
  • 反应孵育时间的理想范围为10分钟至30分钟内出现暗红色显色：低于5分钟表明酶活性过高，建议稀释样品，否则影响检测精度
  • 如果样品的酶活性过低，可以增加孵育时间至72小时
  • 样品的酶活性吸光值在0.1至1.2 OD单位为理想状态，其酶活性与吸光值成线性正相关；吸光值在0.3至0.9 OD单位为状态
  • 反应终止后，即刻进行比色测定
  • 比色测定后，比色皿须清洗*
  • 酶活性单位浓度定义：在37℃温度下，pH6.0的条件下，每单位酶在单位时间内（每分钟）水解1微摩尔的氯苯胺红 -β-D- 吡喃半乳糖苷
  • 本公司提供系列β-半乳糖苷酶检测试剂产品
  • 如：
  •    动物组织衰老特异性β-半乳糖苷酶活性高质敏感比色法定量检测试剂盒