酵母氢ATP酶活性酶连续反应光谱法定量检测试剂盒 产品说明书 |
点击次数:1571 更新时间:2016-07-13 |
主要用途 我公司酵母氢ATP酶(H+-ATPase)活性酶连续反应光谱法定量检测试剂是一种旨在使用氢ATP酶、丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶连续循环法反应系统,在排除其它ATP酶干扰的情况下,受到氢ATP酶的水解产生的ADP过程中,伴随的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)的氧化反应, 即采用光谱法测定其氧化后吸光峰值(NADH浓度)的变化,以此进行测算单位酶活性的而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种酵母细胞H+-ATP酶的特异性活性检测。产品不含污染性蛋白酶,严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,反应优化,检测敏感。 注意事项 1. 本产品为21次操作,包括背景对照测定 2. 操作时,须戴手套 3. 系统操作过程中,背景测定只需1次 4. 建议样品忌用磷酸缓冲溶液、钠盐、钾盐、镁盐、EDTA、EGTA等,可以使用SUCROSE、IMIDAZOLE等 5. 用户如果检测质膜型氢ATP酶活性,建议使用真菌/酵母细胞膜蛋白(本公司提供可溶性真菌/酵母细胞膜蛋白粗提制备试剂盒30043.1) 6. 用户如果检测液泡型氢ATP酶活性,建议使用真菌/酵母细胞液泡蛋白(本公司提供真菌/酵母膜性囊泡(RSOV和IOV)制备试剂盒10169.3) 7. 强化液(Reagent B)为固体状,移取方法为:使用1毫升枪头,将部分剪去;或使用0.5毫升PCR管的盖子内圈盛满;或秤重0.1克 8. 加入样品启动反应后3秒内即刻光谱测定 9. 反应测定值由高到低变化;测定可以持续30分钟 10. 测定值由高到低变化,即0分钟测定读数高于10分钟或30分钟测定读数,表明有酶活性 11. 光谱测定后,比色皿须清洗* 12. 建议待测样本蛋白浓度为50微克/50微升;如果样本酶活性过低或过高,则可以增加或降低样本量;注意计算公式的调整(本公司提供 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒30030.1) 13. 样品特异活性是指排除其它,包括钙(EGTA处理)、钠钾(乌本苷;ouabain处理)等ATP酶的干扰后的氢ATP酶活性 14. 氢ATP酶活性单位浓度定义:在28℃温度下,pH 7.5条件下,每分钟内能够氧化1微摩尔还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)所需的酶量作为一个活性单位 15. 本公司提供系列ATP酶类分析技术产品 如: |
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