大鼠C反应蛋白ELISA试剂盒操作说明书 检测范围：80μg/ L2400μg/ L 96determinations的 目的 此套件可用于测定CRP浓度Ratserum，cellculture物上清或其它相关生物液体 检测原理 该试剂盒检测样本中RatCRP水平，用纯化RatCRP抗体涂层微孔，使固相抗体，然后addCRP的井，CombinedCRP抗体，HRP标记，成为抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物，经过*洗涤后添加TMB底物溶液，在HRP酶催化TMB底物变成蓝色，反应终止通过加入的硫酸溶液和颜色的变化是用分光光度法在450nm波长下测量的。大鼠CRP的浓度的样品中，然后由比较OD值样品的标准曲线。 试剂盒提供的材料 1 洗的解决方案 20ML×1瓶 7 STOPP解决方案 6毫升×1瓶 2 酶标试剂 6毫升×1瓶 8 标准（4800μg/ L） 0.5毫升×1瓶 3 Microelisa stripplate 12well×8strips 9 标准稀释剂 1.5毫升×1瓶 4 样品稀释液 6毫升×1瓶 10 指令 1 5 显色溶液A 6毫升×1瓶 11 封板膜 2 6 显色液B 6毫升×1瓶 12 密封袋 1 标本要求 1。 ，尽快标本采集后，根据相关文献，应该是extractas实验后尽快提取。如果它不能，标本可以保存在-20℃保存，避免反复冻融。 2。无法检测的样品含NaN3，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 分析过程 1。稀释和添加样品：稀释原始密度标准如下表所示： 2400μg/ L的 5标准 150μL原始密度标准+150微升标准稀释剂 1200μg/ L的 4标准 150μL5标准150μL标准稀释剂 600μg/ L的 3标准 150μL4标准150μL标准稀释剂 300μg/ L的 2标准 150μL+150微升3标准标准稀释剂 150微克/ L 1标准 150μL+150微升2标准标准稀释剂 2。加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）。测试样本。加样品稀释液40μl的测试样品，然后加入待测样品10μl（样品终稀释度为5倍），加样井，不触及孔壁尽可能轻轻地混合。 3。温育：闭板后封板膜，在37℃孵育30分钟。 配液：将30倍（或20倍）洗涤溶液稀释30倍（或20倍），用蒸馏水和预定。 5.washing：揭掉封板膜，干discardLiquid，摆动，每孔加满洗涤液，静置30秒后排出，重复5次，拍干。 加酶，每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 温育：操作3。 洗涤：操作5。 9。颜色：，每孔加入显色溶液A的50ul的显色溶液B，避光保存15分钟，在37℃ 反应10.Stop的：加入终止液，每孔，停止反应（黄色的蓝色的颜色变化）。 11.assay：以空白零，读加终止液后15分钟内，在450nm处的吸光度。 步骤说明 标准，样品稀释液 AddStandard，样品稀释液，37℃孵育30分钟。 洗5次，共轭AddHRP的试剂，在37℃孵育30分钟。 洗5次，加入显色解决方案A和B，孵育在37℃30分钟。 AddStopp解决方案 15分钟内，在450nm处的吸光度 计算 计算 以水平的标准密度，OD值为纵坐标，绘制标准曲线在坐标纸上，找出相应的密度，根据样品的OD值由采样曲线，再乘以稀释倍数，或计算直线标准曲线的回归方程，与标准物的浓度与OD值，将样品的OD值代入方程式，计算出样品的密度，乘以稀释倍数，其结果是样品的实际密度。 重要注意事项 1。该试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟，ELISA板涂如果还没有使用后打开，板应装入密封袋中保存。 2。洗涤缓冲液可能会有结晶析出，可被加热的水，可以在稀的情况下溶解。洗涤时不影响结果。 3。加样品采样的每一步，并经常校对其准确性，以避免试验误差。在5分钟内添加样品，如果样品的数量多，推荐使用排。 4。如果待测物质含量过高（样本OD是大于标准品孔*），请稀释样品（n倍），请乘以稀释倍数diluenteand。（×N×5）。 5。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 6。基板避光保存。 7。请严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪作为标准。 8。所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9。不要混用试剂与从其他地段。 储存与有效期 不要将2-8℃。 2.validity：半年 |
ELISA（酶免）试剂盒
人ELISA试剂盒
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