资料下载Down 首 页 > 资料下载 > 组织乙酰辅酶A羧化酶

组织乙酰辅酶A羧化酶

点击次数:1042 发布时间:2015/4/7
提 供 商: 上海哈灵生物科技有限公司 资料大小:
图片类型: 下载次数: 483
资料类型: DOC 浏览次数: 1042
相关产品:
详细介绍: 文件下载    

主要用途

 组织乙酰辅酶A羧化酶(ACETYL-COA CARBOXYLASE)活性光度法定量检测试剂是一种旨在通过底物乙酰辅酶A和碳酸氢盐受到乙酰辅酶A羧化酶的催化反应后,进而由丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶连续循环法反应系统,测定产生ADP过程中,伴随的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸NADH)的氧化反应, 即采用光度法测定其氧化后峰值的变化,以分析组织裂解样品中乙酰辅酶A羧化酶活性的而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的其适用于各种组织裂解萃取液样品(动物、人体)、部分或*纯化酶样品中乙酰辅酶A羧化酶活性的定量检测,以及抑制剂和激活剂的筛选。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,高度敏感。

技术背景

乙酰辅酶A羧化酶(Acetyl CoA Carboxylase;ACC;EC6.4.1.2),又称为乙酰辅酶A碳酸氢盐连接酶(Acetyl CoA:bicarbonate ligase-ATP),是ATP依赖性含生物素酶,参与脂肪酸生物合成。哺乳动物乙酰辅酶A羧化酶单体分子量为225-250Kd,含有许多磷酸化位点,以及1个生物素辅基位点、2个催化位点和1个异构(allosteric)位点。乙酰辅酶A羧化酶催化生物素辅基(prosthetic group)的羧基化反应,然后将生物素上的羧基转移到辅酶A上,产生丙二酰辅酶A(malonyl CoA),成为长链脂肪酸合成前的关键步骤。AMP活化蛋白激酶(AMP-Activated Kinase;AMPK)调节该酶的活性,而十四烷基氧糠酸(5-(tetradecyloxy)-2-furoic acid;TOFA)抑制该酶的活性。基于底物乙酰辅酶A(acetyl CoA)和碳酸氢盐,在ATP的存在下,受到乙酰辅酶A羧化酶的催化,获得产物丙二酰辅酶A和ADP,进而通过丙酮酸激酶(pyruvate kinase;PK)和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase;LDH)反应系统中,还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸reduced nicotinamide adenine dinucleotideNADH)转化为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸oxidized nicotinamide adenine dinucleotideNAD),其吸光峰值的变化340nm,来定量分析乙酰辅酶A羧化酶的活性其反应方式为:

Acetyl CoA Carboxylase

Acetyl Co-A  +  ATP  +  HCO3    Malonyl CoA  +  ADP  +  Pi


pyruvate kinase

Phosphoenolpyruvate   ADP             pyruvate   ATP

         

lactate dehydrogenase

pyruvate  +  NADH             lactate   NAD+