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冰冻切片组织碱性磷酸酶活性染色试剂盒产品说明书

点击次数:1233 发布时间:2015/5/13
提 供 商: 上海哈灵生物科技有限公司 资料大小:
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主要用途


 冰冻切片组织碱性磷酸酶活性染色试剂是一种旨在使偶联偶氮技术,在底物存在的情况下,分析组织样本中碱性磷酸酶表达,而呈现亮红色沉淀现象的而经典的技术方法。该技术经过精心改良、成功实验证明的。主要适用于动物组织冰冻切片,同时也适合原生代或培养细胞的酶活性检测。尤其可用于骨组织病理生理的研究和干细胞分化能力的鉴定。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,灵敏牢固,显色清晰。


技术背景

碱性磷酸酶(ALKALINE PHOSPHATASE在碱性环境下催化各种醇和酚的磷酸酯水解,存在于活跃运输的膜上,如毛细血管及毛细血管的动脉部分的内皮,肾近曲小管壁边缘和小肠上皮的纹状缘,胎盘组织,未分化的干细胞等表达含量为丰富。它与骨质的形成,维持细胞内磷酸酶的浓度,以及与经膜吸收和转运过程有关。偶联偶氮技术的基本原理为碱性磷酸酶水解底物(磷酸萘酯)释放出萘酚,立即为重氮盐所捕获而成为不溶性有色的偶氮染料。实验初(1944)应用β-萘磷酸盐作为底物,释放出的萘酚与重氮α-萘胺偶联,在酶的活动处形成有色沉淀。Burstone 1962)推荐使用替代萘酚,如萘酚AS-MX磷酸盐。重氮盐有很多种,但较适宜的有Fast blue RR,Fast red TR,Fast violet B,Fast blue VRT 和Fast black B。偶联偶氮技术孵育时间短;稳定,灵敏;在正常组织中因无萘酚,故不需要对照;反应产物为偶氮染料难以溶解,不易弥散因而图象清晰。