一、用途 本产品适用于痰液、尿液、浆膜腔积液、脑脊液、创面分泌物及培养物等的抗酸菌染色。 二、原理 抗酸杆菌菌体含有大量的类脂,石炭酸复红在类脂中的溶解度高于酸性酒精,所以不能被酸性酒精脱色,其他细菌脂类含量少,可以被酸性酒精脱色。 三、试剂盒组成 1、石炭酸复红液(Ⅰ液) 1×100ml 或1×250ml 或1×500ml 或1×5L; 2、5%盐酸酒精液(Ⅱ液) 2×100ml 或2×250ml 或2×500ml 或2×5L; 3、亚甲基蓝液(Ⅲ液) 1×100ml 或1×250ml 或1×500ml 或1×5L。 注:本试剂盒按照《中国结核病防治规划·痰涂片镜检质量保证手册》配方配制。 四、染色方法 ⒈ 涂片自然干燥后,放置在染色架上,玻片间距保持10mm以上的距离;火焰固定(在5秒钟内将玻片置于火焰上烤4次)。 ⒉ 滴加石炭酸复红染液,盖满痰膜,火焰加热至出现蒸汽后,脱离火焰,保持染色5分钟。染色期间应始终保持痰膜被染色液覆盖,必要时可续加染色液。加温时勿使染色液沸腾。 ⒊ 流水自玻片一端轻缓冲洗,冲去染色液,沥去标本上剩余的水。 ⒋ 自痰膜上端外缘滴加脱色剂布满痰膜,脱色1分钟;如有必要,需流水洗去脱色液后,再次脱色至痰膜无可视红色为止。 ⒌ 流水自玻片一端轻缓冲洗,冲去脱色液,沥去玻片上剩余的水。 ⒍ 滴加亚甲基蓝染液,染色30秒钟。 ⒎ 流水自玻片一端轻缓冲洗,冲去复染液,然后沥去标本上剩余的水,待玻片干燥后镜检。 一张染色合格的玻片,由于被亚甲基蓝染色而呈亮蓝色。将染色后的玻片放置在报纸上,如能透过痰膜不能分辨报纸上的文字,表明该玻片涂抹过厚。 五、结果 抗酸杆菌染成红色,其它细菌或细胞均染成蓝色。 六、贮存、有效期 本试剂盒应置2-25℃、相对湿度40-75%避光环境保存,有效期两年。 |