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斑马鱼雌二醇（E2）定量检测试剂盒（ELISA）说明书
点击次数：61 发布时间：2026/8/3
提 供 商： 上海哈灵生物科技有限公司 资料大小：
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出品方：上海语燕生物
标注：仅供科研使用，严禁用于临床检验

一、基础信息

  1. 通用名：斑马鱼雌二醇（E2）定量检测试剂盒（ELISA）

  2. 英文名：Zebra fish Estradiol（E2）ELISA KIT

  3. 规格：96T/48T

  4. 检测原理：竞争酶联免疫法，待测 E2 浓度与标记物结合量负相关，酶标仪测 OD 值，拟合标准曲线换算样本浓度。

二、试剂盒组分

  1. 校准品：6 管，0.5ml / 管，浓度：64、25.6、9.6、3.2、1.28、0 pmol/L

  2. 预包被微孔板：96T/48T

  3. HRP 标记 E2 抗原、兔抗 E2 抗体：各 6mL

  4. 底物液 A、底物液 B、终止液：各 6mL（终止液为 2mol/L 稀硫酸）

  5. 20× 浓缩洗涤液：30mL，含 0.15% Tween20 的 PBS 缓冲液

  6. 配套：说明书 1 份、自封袋 1 个

    备注：校准品无乙肝、艾滋、丙肝标志物，整体按潜在感染物处理。

三、自备实验器材

酶标仪、精密移液器及吸头、蒸馏水、洗板机 / 洗瓶、37℃恒温设备、量筒、无粉乳胶手套。

四、储存与有效期

  1. 常规：2~8℃避光冷藏，禁止冷冻，总有效期 6 个月；

  2. 开封后：微孔板密封干燥剂保存，校准品、包被板、HRP 标记物保质期 14 天，其余试剂在总有效期内稳定。

五、样本要求

适用样本

血清、血浆、细胞上清、蛋清，禁止叠氮钠防腐。

前处理

4000rpm 离心 20min 取上清；蛋清 2000~3000rpm 离心 20min 取上清。

保存

2~8℃可存放 72h；-20℃可冻存 6 个月，分装保存，杜绝反复冻融。

六、标准操作流程

  1. 试剂室温平衡 30min，浓缩洗涤液蒸馏水 1:20 稀释待用；

  2. 设空白孔、校准品复孔、样本孔，每孔加对应校准品 / 样本 50μL；

  3. 非空白孔依次加入 HRP 标记抗原、抗体各 50μL，封板，37℃孵育 60min；

  4. 洗板 3 次，每次注满洗液静置 10s，拍干；

  5. 每孔加底物 A、B 各 50μL，混匀，37℃避光显色 15min；

  6. 每孔加终止液 50μL，空白孔调零，酶标仪读取 OD 值。

七、结果计算

  1. 单波长酶标仪：空白孔归零；双波长无需调零；

  2. 结合率 = 样本 / 校准品 OD 值 ÷ 零浓度校准品 OD 值；

  3. Logit-ln 拟合标准曲线，人工绘图或软件计算样本 E2 浓度。

八、性能指标

  1. 检测区间：1.28~64pmol/L；检出限≤1pmol/L；

  2. 回收率：85%~115%；曲线相关系数 | r|≥0.99；

  3. 批内、批间变异系数 CV≤15%；

  4. 液体澄清无沉淀，每次质控结果需在合格范围。

九、注意事项

生物安全

  1. 样本、废液、耗材均按感染废弃物处理；

  2. 试剂含防腐剂、刺激性底物，佩戴手套，避免皮肤、呼吸道接触，实验后洗手。

实验规范

  1. 加样更换枪头防交叉污染，禁止剧烈摇晃起泡；

  2. 底物变蓝即失效，终止液加样顺序与底物保持一致；

  3. 温育时长、洗涤次数严格按标准执行，剩余板条密封低温存放，试剂使用前摇匀。