ELISA试剂盒检测不成功的原因 |
点击次数:2445 更新时间:2022-03-18 |
ELISA试剂盒检测不成功的原因 ELISA试剂盒即酶联免疫吸附试验,是一种常用的固相酶免疫测定方法。 由于ELISA方法灵敏 ,特异性强不需要特殊设备,所以被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因 素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在临床检验中除正常反应外,有时常可见到一些错 误结果(即假阳性或假阴性);本司在这里为大家解读下ELISA试剂盒检测的影响因素中标本 的影响。 氧化酶物质(红细胞或血红蛋白中的亚铁血红素),在洗涤过程中往往难以*洗脱,它可使 H2O2释放出原生态氧(O),从而催化底物四甲基联苯胺生成可溶性的有色物质,即显蓝色, 产生假阳性[2]。所以严重溶血标本禁用。 溶血标本一样,亦可产生非特异性显色而干扰测定结果。 假阳性;为克服上述干扰,ELISA试剂盒测定的血清标本宜为新鲜采集;如不能立即测定,5 d 内测定的血清标本可存放于4℃,1周后测定的血清标本应低温冻存;冻存后融解的标本,蛋白 质局部浓缩,分布不均,应充分混合后再测定,但混匀时应轻柔,不可强烈振荡。 好使用真空采血管;并使用非抗凝标本,肝素抗凝血浆会增加OD值,EDTA、酶抑制剂(如NaN3 )可抑制ELISA系统中辣根过氧化物酶活性。 行离心分离血清,使血清中仍残留部分纤维蛋白原,在ELISA测定过程中可以形成肉眼可见的 纤维蛋白块,易造成假阳性结果;因此血液标本采集后必须使其充分凝固后再分离血清。 |
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