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质粒抽提试剂盒操作注意事项
点击次数：5174 更新时间：2013-08-22
 

         哈灵生物的质粒抽提试剂盒的效率以及得率获得广大客户的*！

 

我们干的研究工作大部分是基因治疗，抽提质粒是一件相当痛苦的事。因为需要做动物的体内实验，您需要静脉注射50微克

 

质粒抽提试剂盒的动物，三次重复注射，每次150毫克，如果有60只需要9。如果需要大量抽提质粒的实验人员就清楚这是需要多大的工作量并且需要提出的是静脉注射动物用的质粒是需要去内毒素的，目前去内毒素得率高的非哈灵生物莫属。

 

    

要有高产率高质量的质粒抽提试剂盒，以下几个关键点要注意：

 

1. 准备必要的设备，根据哈灵生物的协议，连接到的广口瓶，直径45毫米，这是因为必须与瓶可以匹配，操作的真空过滤这一步可以迅速和容易，减少不必要的麻烦。

2. 高拷贝质粒是的，主管细菌是的高拷贝。作为10大，DH5α稍差。主管细菌是刚做不久。

3. 每次在600毫升细菌数量，LB注意水质量一定要好，一定的pH值在7.27.4，摇床转速250转/分，16小时，注意其浓度必须坚强。

4. 操作过程必须与时间的指示一致，严格操作。要注意一点：添加中和在的时间较短，因此需要真空，快速进入下一步。

5.洗脱时间很长，要有耐心，不要让脏兮兮的洗脱液停止。

6.异丙醇沉淀DNA离心在20000转离心45分钟，可以提高20%的产量。

7.是圆底离心管和透明，以免离心破裂，而且操作方便。

8.在一定要提前质粒沉淀在弃异丙醇和乙醇一般位置，不诱导质粒被遗弃了。

9.溶解DNA注意溶液的体积比在手册的说明略小，佳二次溶解，然后混合。

相信注意这些细节后，你将获得每一次以上1.5mg质粒。