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细胞培育实验中合适的细胞培养基和血清怎样选择？

细胞培育是试验室里常见和基本的实验，但是不是简单的。别以为细胞培育是一件简单的事，这里也蕴藏着许多学问。有的时候细胞状况不好的话，会导致转染、药筛这些实验底子没办法做。影响细胞培育的因素有很多，我们先从培养基和血清开始说。

经典的细胞培养基有很多种，例如Invitrogen（GIBCO）、Thermo Fisher（HyClone）、Sigma等公司都可以提供。DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是运用广泛的。其他的例如M199、IMDM、L15培养基等也用于某些细胞的培育。

◆MEM是由Eagle’s基础培育基（BME）开展而来的，其间添加了成分的规格及浓度。

◆Dulbecco改进的BEM（DMEM）培养基是专为小鼠成纤维细胞准备的，常用于贴壁细胞的培育。DMEM中氨基酸浓度是MEM的两倍，维生素浓度是MEM的4倍，选用双倍的HCO3-和CO2浓度可以起到十分好的缓冲效果。开端的配方中葡萄糖含量为1000 mg/L，后来为了满足某些细胞的成长需求，将葡萄糖含量调整为4500 mg/L，这就是我们常说的低糖和高糖了。

◆aMEM含有附加的氨基酸、维生素以及核苷和脂肪酸，它可以广泛用于各种细胞类型，包括对营养成分需求严苛的细胞。

◆Ham’s F12是为在低血清浓度下克隆CHO细胞而规划的，如今也广泛运用于克隆构成率的剖析及原代培育。F12还能够与DMEM等体积混合运用，得到一种高浓度与成分多元化相的产品，这种培养基已运用于许多原代培育及更难养的细胞系的培育。

◆RPMI 1640培养基是用于淋巴细胞培育的，如今已广泛用于悬浮细胞的培育。

曾经常常听到有人问，这种细胞该用哪一种培养基呢?其实这个疑问的答案可以很简单，也可以很复杂。若是这种细胞是购自ATCC或其他的细胞库，那很简单，问供货商就行了。或参考有关的文献。Invitrogen上有一个Cell Line Database的东西，也很好用。挑选你感兴趣的细胞类型，它就会显示相应的培养基、血清和转染试剂等，有时还有优化好的转染进程，很方便。Sigma上也有一个Media Expert，包括培养基一切成分的功用描绘、运用推介和参阅文献等，它仍是一个解决问题的能手，关于细胞培育中的常见疑问，如细胞贴壁欠好、培养基变色等，它都会列出相应的缘由，并提供解决的办法。

如果你是准备树立一种全新细胞的培育体系，并且找不到任何参阅，那你就得花时间自己实验了。在MEM中培育的细胞，很能够在DMEM或M199中成长。总之，MEM做贴壁细胞培育、RPMI 1640做悬浮细胞培育是一个好的开始。你也可以购买多种培养基，然后花大概两周的时间先做一个比较简单的细胞成长试验，然后从中挑选合适的。

以前大多数实验室都是用干粉培养基，但是制作的过程比较麻烦，需要溶解、调节pH值，过滤，在此过程中还会发生浓度误差，而且有些实验室的水质并不抱负，所以培育的效果会有差别。如果使用液体培养基，这种人为的误差会降低。可能你会觉得液体培养基比较贵，以前是这样，但是现在不一样了。HyClone和Invitrogen都在国内建立了液体培养基的生产基地，生产和运输的成本大大下降，所以如今的价格也比较便宜，比干粉培育基贵不了多少，而且还帮你省了过滤器和时间。

血清富含成长因子，可以推进细胞的繁衍，富含的附着因子可推进细胞的贴壁，一起还具有抗胰酶活性。血清也是矿物质、脂类及激素的重要来源。常用的血清有小牛血清、重生牛血清、胎牛血清和马血清等。牛血清是按照采血时间的早晚来分类的。采血时间越早，营养物质越丰富，所含抗体也越少，因而胎牛血清适合需求高的细胞系和克隆化培育。由于疯牛病的原因，到目前为止，中国政府依然制止从北美洲、欧洲和日本等地区进口牛血清，因此国内市面上的牛血清大多来自澳洲、南美洲，或是国产的。

细胞培育实验中合适的细胞培养基和血清怎样选择？