产品中心Products 首 页 > 产品中心 > 检测试剂盒 > 活体细胞溶酶体膜通透性(LMP)/完整性吖啶橙荧光检测试剂盒
 
活体细胞溶酶体膜通透性(LMP)/完整性吖啶橙荧光检测试剂盒
点击放大
产品名称:
活体细胞溶酶体膜通透性(LMP)/完整性吖啶橙荧光检测试剂盒
产品型号:
产品报价:
产品特点:
活体细胞溶酶体膜通透性(LMP)/完整性吖啶橙荧光检测试剂盒是一种旨在通过吖啶橙吸收和细胞内再分布检测技术,选择性地聚集在线粒体内呈现荧光染色,即存在于或由溶酶体释放到细胞浆的荧光染料的不同荧光强度变化,来分析和观察溶酶体膜通透性的而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种活体细胞溶酶体(动物、人体、昆虫等)膜通透性的检测。
  活体细胞溶酶体膜通透性(LMP)/完整性吖啶橙荧光检测试剂盒的详细资料:

本页描述的产品仅供科学实验研究使用,不用于临床,非医疗器械,不做其他用途。

产品编号:10387.1

名称:活体细胞溶酶体膜通透性(LMP)/完整性吖啶橙荧光检测试剂盒    

规格:20次

价格:客服

活体细胞溶酶体膜通透性(LMP)/完整性吖啶橙荧光检测试剂盒保存方式:

保存染色液(Reagent B)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;有效保证6月

用户自备

24孔细胞培养板:用于贴壁细胞染色的容器
1.5毫升离心管:用于细胞染色的容器
微型台式离心机:用于沉淀细胞
培养箱:用于染色孵育

(共聚焦)荧光显微镜:用于细胞荧光分析
荧光分光光度仪或荧光酶标仪:用于细胞荧光定量分析
细胞流式仪:用于细胞荧光分析

实验步骤

  • 贴壁细胞染色
  • 准备1个细胞培养24孔板的待测细胞(注意:可以使用载玻片,载玻片培养皿,35mm培养皿,和其它培养孔板,见注意事项8)
  • 小心抽去细胞培养液
  • 小心沿着孔壁加入xx微升37℃预热的清理液(Reagent A)到1个细胞培养孔,覆盖培养孔表面
  • 小心抽去清理液
  • 小心沿着孔壁加入xx微升染色液(Reagent B)到1个细胞培养孔,覆盖培养孔表面
  • 放进37℃细胞培养箱里孵育15分钟,避免光照
  • 小心抽去染色液(Reagent B)
  • 小心沿着孔壁加入xx微升37℃预热的清理液(Reagent A)到细胞培养孔
  • 小心抽去清理液
  • 重复实验步骤8和9一次
  • 小心沿着孔壁加入xx微升37℃预热的清理液(Reagent A)到细胞培养孔
  • 选择下列方式之一进行操作:

(A)使用倒置荧光显微镜观察(定性检测):

激发波长490nm,散发波长528nm――绿色荧光增强,表明膜通透性(LMP)增强

激发波长555nm,散发波长617nm――红色荧光减弱,表明膜通透性(LMP)增强

  • 使用荧光分光光度仪或荧光酶标仪检测(定量检测):

激发波长490nm,散发波长528nm――RFU升高,表明膜通透性(LMP)增强

激发波长555nm,散发波长617nm――RFU降低,表明膜通透性(LMP)增强

二、悬浮细胞或脱离细胞染色

1.将悬浮细胞或脱离细胞(1 X 106细胞)移入到1.5毫升离心管
2.放进微型台式离心机离心5分钟,速度为300g(或2000RPM,例如eppendorf 5415)
3.小心抽去上清液
4.加入xx微升37℃预热的清理液(Reagent A),混匀细胞颗粒群
5.放进微型台式离心机离心5分钟,速度为300g(或2000RPM,例如eppendorf 5415)
6.小心抽去上清液
7.加入xx微升37℃预热的清理液(Reagent A),混匀细胞颗粒群
8.加入xx微升含有染色液(Reagent B),充分混匀 
9.放进37℃细胞培养箱里孵育15分钟,避免光照
10.放进微型台式离心机离心5分钟,速度为300g(或2000RPM,例如eppendorf 5415)
11.小心抽去上清液
12.加入xx微升37℃预热的清理液(Reagent A),混匀细胞颗粒群
13.放进微型台式离心机离心5分钟,速度为300g(或2000RPM,例如eppendorf 5415)
14.小心抽去上清液
15.重复实验步骤12至14一次
16.加入xx微升37℃预热的清理液(Reagent A),混匀细胞颗粒群
17.选择下列方式之一进行操作:
a)进行细胞流式仪分析:FL1(激发波长488nm,散发波长528nm),或FL3(激发波长555nm,散发波长617nm)观察10000个细胞以上――
FL1:波峰右移,表明膜通透性(LMP)增强
FL3:波峰左移,表明膜通透性(LMP)增强

b)或使用(共聚焦)荧光显微镜观察(定性检测):
1)移取10微升上述细胞悬液到载波片上,盖上盖玻片 
激发波长490nm,散发波长528nm――绿色荧光增强,表明膜通透性(LMP)增强
激发波长555nm,散发波长617nm――红色荧光减弱,表明膜通透性(LMP)增强

c)或使用荧光分光光度仪检测(定量检测):
1)移取500微升上述细胞悬液到1毫升比色杯
2)加入xx微升清理液(Reagent A)
3)上下倾倒混匀数次
4)放进荧光分光光度仪:
激发波长490nm,散发波长528nm――RFU升高,表明膜通透性(LMP)增强
激发波长555nm,散发波长617nm――RFU降低,表明膜通透性(LMP)增强

注意事项

1.本产品为20次(0.5毫升体系/次)操作
2.操作时,须戴手套
3.操作时,避免污染母液
4.建议细胞染色完成后,即刻进行荧光检测分析 
5.孵育时,必须避免光照
6.本产品适合各种规格的培养细胞:载玻片,载玻片培养皿,35mm培养皿,和各种培养孔板,须相应

调整处理液:

操作容器    建议操作体系
载玻片    100微升
载玻片培养皿    1毫升
35mm培养皿    1毫升
96孔培养板    100微升
48孔培养板    200微升
24孔培养板    500微升
12孔培养板    1毫升
6孔培养板    2毫升
25cm2细胞培养瓶    3毫升

7.可以使用绿色荧光中激发波长490nm±20,散发波长528±38;红色荧光中激发波长555±28,散发波长617±50
8.用户可以持续读数5分钟,观察荧光读数的增强或减低,以表明荧光染料的移位变化  
9.本公司提供系列溶酶体分析试剂产品

产品相关关键字: 活体细胞溶酶体膜通透性 LMP 完整性吖啶橙荧光
 如果你对活体细胞溶酶体膜通透性(LMP)/完整性吖啶橙荧光检测试剂盒感兴趣,想了解更详细的产品信息,填写下表直接与厂家联系:

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
 相关同类产品: