吐温20 9005-64-5试剂,是一种亲水性非离子表面活性剂。其化学结构包含疏水的月桂酸基团和亲水的聚氧乙烯链,HLB值约为16.7,具有优良的乳化和增溶性能。在常温下呈粘稠油状液体,可溶于水、乙醇及乙酸乙酯。在生命科学研究中,吐温20是的基础试剂:
免疫印迹与ELISA:常以0.05%-0.1%的浓度添加到洗涤缓冲液(如TBST)中,用于减少膜或孔板上的非特异性吸附,降低背景噪音;同时也用作封闭液的添加剂。
蛋白纯化与保存:在蛋白层析和储存缓冲液中,吐温20能防止蛋白聚集和沉淀,维持蛋白质的天然构象与活性。
细胞生物学:由于其温和的特性,常用于细胞膜的通透化处理或作为细胞培养添加剂。
使用时需注意,高浓度吐温20可能会破坏细胞膜结构或干扰某些酶活性。建议根据实验需求优化浓度,并现用现配或低温保存以防止氧化变质。本品仅供实验室科学研究使用,严禁用于临床医疗或人体注射。
吐温20 9005-64-5试剂
常见问答(QA)
Q1:吐温20和吐温80有什么区别?
A:主要区别在于脂肪酸链不同。吐温20结合的是月桂酸(C12),而吐温80结合的是油酸(C18,含双键)。吐温20亲水性更强(HLB值更高),去污能力稍弱但更温和;吐温80疏水性稍强,乳化能力更强。在WB洗涤中两者常可互换,但在特定蛋白稳定实验中需筛选。
Q2:配制含吐温20的缓冲液(如TBST)时需要注意什么?
A:吐温20粘度较大,直接吸取困难且不易混匀。建议先配制成10%或20%的母液(Stock Solution),室温或4℃保存,使用时再稀释至工作浓度(如0.1%)。若溶液出现浑浊或分层,可能是温度过低或变质,需检查后使用。
Q3:吐温20在Western Blot中起什么作用?
A:主要起洗涤和降低背景的作用。它能洗去未结合的抗体和抗原,同时通过其两亲性占据膜上的非特异性结合位点,防止抗体非特异性吸附,从而获得清晰的条带。
Q4:吐温20溶液可以高压灭菌吗?
A:一般不建议高压灭菌。高温可能导致聚氧乙烯链断裂或氧化变质。通常建议使用0.22μm滤膜过滤除菌,或在配制时使用无菌水和容器。
Q5:为什么我的吐温20放置久了颜色变深?
A:吐温20含有不饱和键或醚键,长期接触空气易发生氧化反应导致颜色变深(褐变)。氧化产物可能会影响实验结果(如增加背景荧光或淬灭信号)。建议购买小包装,充氮保存或添加抗氧化剂,变色严重时建议废弃。
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吐温 80 (Polysorbate 80, CAS 9005-65-6):另一种常用非离子表面活性剂,疏水性略强,常用于细胞裂解或药物增溶。
Triton X-100 (CAS 9002-93-1):非离子型去污剂,去污能力强于吐温20,常用于强效细胞裂解和膜蛋白提取。
NP-40 (Nonidet P-40):温和的非离子去污剂,常用于免疫共沉淀(Co-IP)和保持蛋白复合体完整性。
SDS (十二烷基, CAS 151-21-3):阴离子表面活性剂,具有强变性作用,是SDS-PAGE电泳的核心成分。
CHAPS (CAS 75621-03-3):两性离子去污剂,兼具有非离子和离子去污剂的优点,常用于等电聚焦电泳和膜蛋白溶解。
BSA (牛血清白蛋白, CAS 9048-46-8):常与吐温20配合使用,作为Western Blot和ELISA的封闭剂。
脱氧胆酸钠 (Sodium Deoxycholate, CAS 302-95-4):离子型去污剂,常与NP-40复配(RIPA缓冲液)用于增强裂解效果。
PEG 4000 / PEG 6000:聚乙二醇,常作为沉淀剂或融合剂,与吐温类同属聚合物试剂。
Brij 35 (CAS 9002-92-0):脂肪醇聚氧乙烯醚类非离子表面活性剂,性质温和,常用于酶学反应体系。
Tween 20-free Protease Inhibitor Cocktail:不含吐温20的蛋白酶抑制剂 cocktail,适用于对表面活性剂敏感的下游实验。